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自動液相色譜分離層析儀是否一定要評價柱效?
更新時間:2021-10-19   點擊次數(shù):1505次
  自動液相色譜分離層析儀是從事生命科學研究、藥物測定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品科學及大專院校及醫(yī)療單位等行業(yè)的現(xiàn)代分析實驗儀器。
 
  自動液相色譜分離層析儀分離具有紫外吸收物質(zhì)(蛋白、核酸、多肽、酶)的一種紫外檢測裝置,其原理是根據(jù)物質(zhì)(樣品)對紫外光有明顯吸收的特征,實現(xiàn)對樣品成份含量比對分析,以便進行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識別檢測和含量測定??芍苯幼x出光密度A值,且波長準確度和重復性高、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個峰面積的相對峰面值,并能計算質(zhì)量相對的含量。
 
  自動液相色譜分離層析儀配上采集器、恒流泵、部分收集器、梯度混合器、層析柱,即組成一套完整的自動液相色譜分離分析裝置,實驗室規(guī)模層析柱接口*兼容,不需要任何連接件即可在AKTA等設(shè)備系統(tǒng)進行預分離,可滿足凝膠滲透層析、親和層析、離子交換層析等多種色譜分析的使用要求,具有*的性能價格比。
 
  自動液相色譜分離層析儀是否一定要評價柱效?
 
  總體來說,還是建議進行柱效評價的,但柱效評價標準不能一概而論。
 
  高標準:1)分子篩層析;2)反相層析;3)疏水層析;4)采用階性梯度或線性梯度洗脫的離子交換層析。此類層析對分離度有較高要求,有些需要采用多梯度洗脫或線性洗脫,如果柱效不佳,往往會造成峰擴散或拖尾,會對純化效果產(chǎn)生很大影響。
 
  低標準:1)親和層析;2)采用單梯度洗脫的離子交換層析。此類層析僅需采用單梯度洗脫,有時在產(chǎn)物洗脫下來后,還要立即進行稀釋,以防產(chǎn)物聚集,因此對分離度要求較低。然而,過于嚴重的峰擴散和拖尾,也是會影響純化效率的,因此柱效測定也*。
 
  僅要求峰型及對稱性:流穿模式。此類模式為目標產(chǎn)物流穿,雜質(zhì)被吸附,如果填料裝填不均勻,或者過于松散,仍會導致吸附不勻而影響載量和處理量。因此,評估柱效時建議觀察一下峰型及對稱性,如果峰型平滑,且對稱性良好,即可接受。
 
  建議標準:0.8
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